Projekt se osredotoča na razvoj, validacijo in klinično uvedbo terapije z imunohibridomi aHyC za zdravljenje trojno negativnega raka dojke (TNBC/TNRD). Povezuje slovenske in italijanske partnerje z namenom vzpostavitve proizvodnega procesa v skladu z dobro proizvodno prakso (GMP), priprave potrebne regulativne in etične dokumentacije ter omogočanja čezmejnega vključevanja bolnikov v klinično študijo. Projekt se je uradno začel z uvodnim spletnim sestankom 7. septembra 2023, na katerem so partnerji pregledali cilje projekta, aktivnosti delovnih sklopov, administrativne obveznosti, časovnico izvedbe in pričakovane rezultate. Imenovan je bil tudi usmerjevalni odbor, sestavljen iz predstavnikov vseh projektnih partnerjev, ki podpira učinkovito koordinacijo med projektnimi partnerji in vodilnim partnerjem.

Razvoj postopka priprave aHyC
Osrednji del projekta je prilagoditev protokolov za pripravo aHyC za indikacijo trojno negativnega raka dojke. V prvi fazi izvajanja so partnerji ZTM, VBC in Celica uskladili protokol za pripravo dendritičnih celic z uporabo bioreaktorja NANT-XL ter določili specifikacije levkafereznega produkta, potrebnega za izolacijo monocitov. Te aktivnosti so bile pregledane na prvem periodičnem sestanku, ki je potekal 26. januarja 2024 v živo v prostorih podjetja Celica v Ljubljani. V tej fazi so bili protokoli za pripravo aHyC prilagojeni za zdravljenje TNBC/TNRD, pripravljen pa je bil tudi osnutek protokola klinične študije za zdravljenje bolnikov s TNBC/TNRD z uporabo aHyC. Protokol je kasneje prešel v začetno izvedbeno fazo in se dodatno prilagaja glede na značilnosti tumorskih celic. Imunohibridomi se že pripravljajo v skladu z zahtevami dobre proizvodne prakse (GMP), kar omogoča začetek proizvodnje za bolnike po izpolnitvi kliničnih in regulativnih pogojev.

Dobra proizvodna praksa (GMP) in validacija tehnologije NANT
Implementacija tehnologije NANT v okolje dobre proizvodne prakse predstavlja enega ključnih tehničnih stebrov projekta. Po drugem rednem projektnem sestanku 7. avgusta 2024 so partnerji nadaljevali z usklajevanjem standardov kakovosti in priprave levkafereznih produktov. V sodelovanju z VBC se je začela implementacija tehnologije NANT v okolju GMP. VBC je nato v prostore podjetja Celica namestil bioreaktor NANT-XLP, izvedel posodobitev programske opreme in optimiziral protokol za izolacijo dendritičnih celic. ZTM je zagotovil pet vzorcev levkafereze, ki so bili za namen validacije obdelani tako ročno kot z uporabo bioreaktorja NANT-XLP. Validacija bioreaktorja NANT-XLP je bila zaključena z dvema dodatnima validacijskima cikloma. Rezultati so potrdili, da je kakovost celic, pridobljenih z uporabo bioreaktorja, primerljiva s kakovostjo ročno pripravljenih celic. To predstavlja pomemben korak k standardizaciji proizvodnega procesa in povečanju prihodnjih proizvodnih zmogljivosti. Naslednji tehnični korak je poglobljeno ovrednotenje rezultatov diferenciacije med ročno metodo priprave in metodo priprave z uporabo bioreaktorja.

Optimizacija levkafereze in kazalniki kakovosti
ZTM je optimiziral postopek afereze, vključno z ločevanjem komponent, ter izvedel zbiranje pri zdravem darovalcu. Levkaferezni produkti so bili pripravljeni po optimiziranem protokolu ZTM in so uspešno prestali zahtevane biološke teste za nadaljnjo obdelavo. Izmerjenih je bilo več bioloških parametrov, med drugim aktivacija trombocitov in delež imunosupresivnih monocitov CD14+DR lo/neg. Ti parametri lahko služijo kot kazalniki kakovosti pri prihodnjih postopkih in podpirajo nadzor procesa pri klinični pripravi terapevtskega produkta.

Regulativna in etična priprava
Regulativna in etična priprava sta pomemben del projekta že od začetnih faz. Do zaključka druge izvedbene faze je bila pripravljena dokumentacija za oddajo na Javno agencijo Republike Slovenije za zdravila in medicinske pripomočke (JAZMP) ter na Komisijo Republike Slovenije za medicinsko etiko. Novembra 2024 je bila v sodelovanju z JAZMP organizirana delavnica, namenjena obravnavi pravnih in etičnih zahtev za vključevanje bolnikov v čezmejno klinično študijo. To je bilo posebej pomembno, saj projekt vključuje slovenske in italijanske partnerje ter podpira čezmejno vključevanje bolnikov. Po pregledu s strani JAZMP in Nacionalnega etičnega odbora so bila vprašanja naslovljena v revidiranem protokolu klinične študije. V petem projektnem obdobju, po periodičnem sestanku 17. oktobra 2025, so partnerji dorekli časovnico izvedbe preostalih aktivnosti ter predložili prenovljeno vlogo za odobritev klinične študije pri JAZMP in Komisiji Republike Slovenije za medicinsko etiko. Pridobljena je bila vmesna ocena, ugotovljene nejasnosti pa so bile naslovljene. Klinična študija je bila odobrena februarja 2026.

Načrt kliničnega preskušanja
Odobreno klinično preskušanje se bo začelo s študijo faze 1, v katero bo vključenih 10 bolnikov s TNBC/TNRD. Glavni namen te faze je ocena varnostnega profila terapije. Po zaključku faze 1 bo projektna skupina analizirala podatke, pridobljene med preskušanjem. Če bo varnostni profil terapije ugoden, se bo študija nadaljevala s fazo 2, v katero bo predvidoma vključenih 72 bolnikov. Pripravljen je tudi dokument z informacijami o kliničnem preskušanju in soglasjem za bolnike, ki ustrezajo vključitvenim kriterijem in se želijo vključiti v študijo. Po odobritvi februarja 2026 lahko projekt preide iz regulativne priprave v fazo vključevanja bolnikov in klinične izvedbe.

Čezmejno vključevanje bolnikov
Projekt je zasnovan kot čezmejna klinična pobuda, ki vključuje partnerje iz Slovenije in Italije. V Italiji sta partnerja PP5-ASUFC in PP4-UNIUD identificirala ustrezne bolnišnice in začela njihovo vključevanje v pripravo študije. Italijanskemu regionalnemu etičnemu odboru sta predložila tudi osnutek kliničnega protokola. Italijanski bolniki so redno obveščeni o možnosti vključitve v študijo. ASUFC spremlja letno kohorto več kot 50 bolnikov s TNBC/TNRD, kar predstavlja pomembno podlago za prihodnje vključevanje bolnikov. V tretjem projektnem obdobju je LP1-Celica na sedežu JAZMP organizirala posvet z udeležbo vseh projektnih partnerjev. Namen srečanja je bil opredeliti kriterije za vključevanje čezmejnih bolnikov. Partnerji PP5-ASUFC, PP4-UNIUD in VBC pripravljajo tudi predlog medregionalne platforme za vključevanje bolnikov. Platforma bo vsebovala informacije o zahtevah in obveznostih za bolnike in bolnišnice ter podpirala usklajeno vključevanje bolnikov med regijami.

Časovnica projekta in ključni mejniki
Projekt se je začel 1. septembra 2023, uvodni spletni sestanek pa je potekal 7. septembra 2023. Partnerji so pregledali vsebino projekta, načrtovane aktivnosti, administrativne obveznosti, strukturo delovnih sklopov in časovnico za doseganje rezultatov. 

Prvi periodični sestanek je potekal 26. januarja 2024 v podjetju Celica v Ljubljani. Partnerji so uskladili protokol za pripravo dendritičnih celic, določili specifikacije levkafereznega produkta in prilagodili protokole za pripravo aHyC za zdravljenje TNBC/TNRD. Povezan intervju je bil objavljen tudi v lokalnem mediju:
https://sis-egiz.eu/2024/01/30/preboji-so-na-pragu/

Drugo redno srečanje je potekalo 7. avgusta 2024 in je bilo osredotočeno na ključne mejnike projekta. Partnerji so delali na usklajevanju standardov kakovosti levkafereznih produktov, implementaciji tehnologije NANT v okolju GMP, optimizaciji postopkov afereze in merjenju bioloških kazalnikov kakovosti. Novembra 2024 je bila v sodelovanju z JAZMP izvedena delavnica, namenjena obravnavi pravnih in etičnih zahtev za vključevanje bolnikov v čezmejno klinično študijo.

Tretji periodični sestanek je potekal na daljavo februarja 2025. Partnerji so pregledali stanje protokola za pripravo aHyC, implementacijo bioreaktorja NANT-XLP, obdelavo vzorcev levkafereze in validacijo metode priprave z uporabo bioreaktorja. Izbrane vsebine projekta so bile predstavljene širši javnosti v znanstveni oddaji Ugriznimo znanost na RTV SLO 1, v epizodi z naslovom »Človeška celica«, ki je bila predvajana 8. maja 2025:
https://365.rtvslo.si//arhiv/ugriznimo-znanost/175130194

Četrto periodično partnersko srečanje je potekalo na daljavo julija 2025. Partnerji so pregledali napredek in uskladili nadaljnje korake. Trajanje projekta je bilo podaljšano do konca leta 2025.

Peti periodični sestanek je potekal 17. oktobra 2025. Partnerji so dorekli časovnico preostalih aktivnosti ter predložili prenovljeno vlogo za klinično študijo pri JAZMP in Komisiji Republike Slovenije za medicinsko etiko.

Zaključno projektno srečanje je potekalo 5. decembra 2025 na Onkološkem inštitutu v Ljubljani. Projektni partnerji so predstavili izvedene aktivnosti in dosežke, dosežene v obdobju trajanja projekta. Decembra 2025 je projektna skupina organizirala tudi spletno tiskovno konferenco, na kateri je projekt in njegove rezultate predstavila novinarjem in širši javnosti. Klinična študija je bila odobrena februarja 2026, kar omogoča nadaljevanje v smeri vključevanja bolnikov in izvedbe kliničnega preskušanja faze 1 pri bolnikih s TNBC/TNRD.