Il progetto si concentra sullo sviluppo, sulla validazione e sull’introduzione clinica della terapia con immunoibridomi aHyC per il trattamento del carcinoma mammario triplo negativo (TNBC). Il progetto riunisce partner sloveni e italiani con l’obiettivo di istituire un processo produttivo conforme alle Buone Pratiche di Fabbricazione (GMP), preparare la documentazione regolatoria ed etica necessaria e consentire l’inclusione transfrontaliera dei pazienti nello studio clinico. Il progetto è stato avviato ufficialmente con un incontro di kick-off online il 7 settembre 2023, durante il quale i partner hanno esaminato gli obiettivi del progetto, le attività dei gruppi di lavoro, gli obblighi amministrativi, la tempistica di attuazione e i risultati attesi. È stato inoltre istituito un comitato direttivo, composto dai rappresentanti di tutti i partner di progetto, con il compito di supportare un efficace coordinamento tra i partner e il partner capofila.

Sviluppo del processo di preparazione di aHyC
Una parte centrale del progetto è stata l’adattamento dei protocolli di preparazione di aHyC per l’indicazione del carcinoma mammario triplo negativo. Durante la prima fase di attuazione, i partner ZTM, VBC e Celica hanno armonizzato il protocollo per la preparazione delle cellule dendritiche utilizzando il bioreattore NANT-XL e hanno definito le specifiche del prodotto di leucaferesi necessario per l’isolamento dei monociti. Queste attività sono state esaminate durante il primo incontro periodico, svoltosi in presenza il 26 gennaio 2024 presso la sede di Celica a Lubiana. In questa fase, i protocolli di preparazione di aHyC sono stati adattati al trattamento del TNBC ed è stata preparata una bozza del protocollo di studio clinico per il trattamento dei pazienti con TNBC mediante aHyC. Successivamente, il protocollo è entrato nella fase iniziale di implementazione e viene ulteriormente adattato in base alle caratteristiche delle cellule tumorali. Gli immunoibridomi sono già in preparazione secondo i requisiti della Buona Pratica di Fabbricazione (GMP), consentendo l’avvio della produzione per i pazienti una volta soddisfatte le condizioni cliniche e regolatorie.

Produzione conforme alle GMP e validazione della tecnologia NANT
L’implementazione della tecnologia NANT in un ambiente conforme alle GMP rappresenta uno dei principali pilastri tecnici del progetto. A seguito del secondo incontro periodico del progetto, svoltosi il 7 agosto 2024, i partner hanno proseguito il lavoro di armonizzazione degli standard di qualità e della preparazione dei prodotti di leucaferesi. In collaborazione con VBC, è stata avviata l’implementazione della tecnologia NANT in un ambiente conforme alle GMP. VBC ha successivamente installato il bioreattore NANT-XLP presso la sede di Celica, ha aggiornato il software e ha ottimizzato il protocollo per l’isolamento delle cellule dendritiche. ZTM ha fornito cinque campioni di leucaferesi, che sono stati processati sia manualmente sia mediante il bioreattore NANT-XLP a fini di validazione. La validazione del bioreattore NANT-XLP è stata completata attraverso due ulteriori cicli di validazione. I risultati hanno confermato che la qualità delle cellule ottenute tramite il bioreattore è comparabile a quella delle cellule preparate manualmente. Questo rappresenta un passo importante verso la standardizzazione del processo produttivo e l’aumento della futura capacità produttiva. Il prossimo passo tecnico sarà una valutazione dettagliata dei risultati della differenziazione ottenuti con il metodo manuale rispetto al metodo basato sul bioreattore.

Ottimizzazione della leucaferesi e indicatori di qualità
ZTM ha ottimizzato la procedura di aferesi, inclusa la separazione delle componenti, ed effettuato una raccolta da un donatore sano. I prodotti di leucaferesi sono stati preparati secondo il protocollo ZTM ottimizzato e hanno superato i test biologici richiesti per il successivo processamento. Sono stati misurati diversi parametri biologici, tra cui l’attivazione delle piastrine e la percentuale di monociti immunosoppressivi CD14+DR lo/neg. Questi parametri potranno fungere da indicatori di qualità per le procedure future e contribuire al controllo del processo nella preparazione clinica del prodotto terapeutico.

Preparazione regolatoria ed etica
La preparazione regolatoria ed etica ha rappresentato una componente importante del progetto fin dalle sue prime fasi. Entro la fine della seconda fase di attuazione, è stata preparata la documentazione da presentare alla JAZMP — Agenzia per i Medicinali e i Dispositivi Medici della Slovenia e alla Commissione della Repubblica di Slovenia per l’Etica Medica. Nel novembre 2024 è stato organizzato, in collaborazione con JAZMP, un workshop dedicato ai requisiti legali ed etici per l’inclusione dei pazienti in uno studio clinico transfrontaliero. Questo aspetto è stato particolarmente importante poiché il progetto coinvolge partner sloveni e italiani e mira a sostenere il reclutamento transfrontaliero dei pazienti. A seguito della revisione da parte di JAZMP e del Comitato Etico Nazionale, le questioni emerse sono state affrontate nel protocollo di studio clinico revisionato. Nel quinto periodo del progetto, dopo l’incontro periodico del 17 ottobre 2025, i partner hanno definito la tempistica per l’attuazione delle attività rimanenti e hanno presentato una domanda aggiornata per l’approvazione dello studio clinico a JAZMP e alla Commissione della Repubblica di Slovenia per l’Etica Medica. È stata ricevuta una valutazione intermedia e le ambiguità individuate sono state chiarite. Lo studio clinico è stato approvato nel febbraio 2026.

Piano della sperimentazione clinica
La sperimentazione clinica approvata inizierà con uno studio di fase 1, che coinvolgerà 10 pazienti con TNBC. Lo scopo principale di questa fase è valutare il profilo di sicurezza della terapia. Dopo il completamento della fase 1, il gruppo di progetto analizzerà i dati raccolti durante la sperimentazione. Se il profilo di sicurezza della terapia risulterà favorevole, lo studio proseguirà con la fase 2, con un arruolamento stimato di 72 pazienti. È già stato preparato anche un documento informativo sullo studio clinico, comprensivo del consenso informato, destinato ai pazienti che soddisfano i criteri di inclusione e desiderano partecipare allo studio. A seguito dell’approvazione ottenuta nel febbraio 2026, il progetto può passare dalla preparazione regolatoria all’arruolamento dei pazienti e all’implementazione clinica.

Inclusione transfrontaliera dei pazienti
Il progetto è concepito come un’iniziativa clinica transfrontaliera che coinvolge partner sloveni e italiani. In Italia, PP5-ASUFC e PP4-UNIUD hanno individuato ospedali idonei e avviato il loro coinvolgimento nella preparazione dello studio. Hanno inoltre presentato una bozza del protocollo clinico al comitato etico regionale italiano. I pazienti italiani vengono costantemente informati sulla possibilità di partecipare allo studio. ASUFC segue una coorte annuale di oltre 50 pazienti con TNBC, fornendo una base importante per il futuro reclutamento dei pazienti. Durante il terzo periodo del progetto, LP1-Celica ha organizzato presso la sede di JAZMP un incontro con gli stakeholder, con la partecipazione di tutti i partner di progetto. Lo scopo dell’incontro era definire i criteri per l’inclusione transfrontaliera dei pazienti. I partner PP5-ASUFC, PP4-UNIUD e VBC stanno inoltre sviluppando una proposta per una piattaforma interregionale per il reclutamento dei pazienti. La piattaforma includerà informazioni sui requisiti e sugli obblighi per pazienti e ospedali e sosterrà un reclutamento coordinato tra le regioni.

Cronologia del progetto e principali traguardi
Il progetto è iniziato il 1° settembre 2023, mentre l’incontro di kick-off online si è svolto il 7 settembre 2023. I partner hanno esaminato il contenuto del progetto, le attività previste, gli obblighi amministrativi, la struttura dei gruppi di lavoro e la tempistica per il raggiungimento dei risultati.

Il primo incontro periodico si è svolto il 26 gennaio 2024 presso Celica a Lubiana. I partner hanno armonizzato il protocollo per la preparazione delle cellule dendritiche, definito le specifiche del prodotto di leucaferesi e adattato i protocolli di preparazione di aHyC per il TNBC. È stata pubblicata anche un’intervista collegata nei media locali:
https://sis-egiz.eu/2024/01/30/preboji-so-na-pragu/

Il secondo incontro periodico si è svolto il 7 agosto 2024 e si è concentrato sui principali traguardi del progetto. I partner hanno lavorato all’armonizzazione degli standard di qualità dei prodotti di leucaferesi, all’implementazione della tecnologia NANT in un ambiente conforme alle GMP, all’ottimizzazione delle procedure di aferesi e alla misurazione degli indicatori biologici di qualità. Nel novembre 2024 si è svolto, in collaborazione con JAZMP, un workshop dedicato ai requisiti legali ed etici per l’inclusione dei pazienti in uno studio clinico transfrontaliero.

Il terzo incontro periodico si è svolto online nel febbraio 2025. I partner hanno esaminato lo stato del protocollo di preparazione di aHyC, l’implementazione del bioreattore NANT-XLP, il processamento dei campioni di leucaferesi e la validazione del metodo basato sul bioreattore. Alcuni contenuti del progetto sono stati presentati al grande pubblico nel programma scientifico di RTV SLO 1 Ugriznimo znanost, nell’episodio intitolato “La cellula umana”, trasmesso l’8 maggio 2025:
https://365.rtvslo.si//arhiv/ugriznimo-znanost/175130194

Il quarto incontro periodico dei partner si è svolto online nel luglio 2025. I partner hanno esaminato i progressi compiuti e concordato i passi successivi. La durata del progetto è stata prorogata fino alla fine del 2025.

Il quinto incontro periodico si è svolto il 17 ottobre 2025. I partner hanno definito la tempistica per le attività rimanenti e hanno presentato una domanda aggiornata per lo studio clinico a JAZMP e alla Commissione della Repubblica di Slovenia per l’Etica Medica.

L’incontro finale del progetto si è svolto il 5 dicembre 2025 presso l’Istituto Oncologico di Lubiana. I partner di progetto hanno presentato le attività svolte e i risultati raggiunti durante il periodo di attuazione del progetto. Nel dicembre 2025, il gruppo di progetto ha inoltre organizzato una conferenza stampa online per presentare il progetto e i suoi risultati ai giornalisti e al pubblico generale. Lo studio clinico è stato approvato nel febbraio 2026, consentendo al progetto di procedere verso l’arruolamento dei pazienti e l’implementazione della sperimentazione clinica di fase 1 per il TNBC.